動物組織-染色質(zhì)免疫共沉淀測序(ChIP-seq)
染色質(zhì)免疫共沉淀(Chromatin Immunoprecipitation,ChIP),是研究體內(nèi)蛋白質(zhì)與DNA相互作用的經(jīng)典方法。將ChIP與高通量測序技術(shù)相結(jié)合的ChIP-Seq技術(shù),可在全基因組范圍對特定蛋白的DNA結(jié)合位點進行高效而準確的篩選與鑒定,為研究的深入開展打下基礎。
DNA與蛋白質(zhì)的相互作用與基因的轉(zhuǎn)錄、染色質(zhì)的空間構(gòu)型和構(gòu)象密切相關(guān)。運用組蛋白特定修飾的特異性抗體或DNA結(jié)合蛋白或轉(zhuǎn)錄因子特異性抗體富集與其結(jié)合的DNA片段,并進行純化和文庫構(gòu)建,然后進行高通量測序,通過將獲得的數(shù)據(jù)與參考基因組精確比對,研究人員可獲得全基因組范圍內(nèi)某種修飾類型的特定組蛋白或轉(zhuǎn)錄因子與基因組DNA序列之間的關(guān)系,也可對多個樣品進行差異比較。
DNA與蛋白質(zhì)互作(ChIP):提供組蛋白修飾、轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合等抗體富集、建庫測序、數(shù)據(jù)分析全流程服務。具有細胞,動、植物組織,微生物(弓形蟲、煙粉虱等)等不同樣本富集建庫經(jīng)驗。
技術(shù)優(yōu)勢:
1)物種范圍廣:細胞、動物組織、植物組織、細菌微生物多物種富集經(jīng)驗;
2)微量建庫:只需5ng以上免疫沉淀后的DNA,即可展開測序分析;
3)方案靈活:根據(jù)不同的項目需求,選擇不同的組蛋白修飾特異性抗體。
實驗策略:
分析內(nèi)容:
送樣要求:
項目案例:
標題:A meet-up of acetyl phosphate and c-di-GMP modulates BldD activity for development and antibiotic production
發(fā)表雜志:Nucleic Acids Res
影響因子:14.6
發(fā)表年份:2023
(2)微生物:煙粉虱
標題:A bacteriocyte symbiont determines whitefly sex ratio by regulating mitochondrial function
發(fā)表雜志:Cell Reports
影響因子:8.8
發(fā)表年份:2023
使用H3K9me3抗體對±HBt煙粉虱進行ChIP-seq分析
(3)細胞:小鼠
標題:ARTICLE JMJD3 acts in tandem with KLF4 to facilitate reprogramming to pluripotency
發(fā)表雜志:Nat Commun
影響因子:16.6
發(fā)表年份:2020
ChIP-seq揭示小鼠細胞重編程過程中JMJD3與KLF4協(xié)同作用
參考文獻:
① Fu Y,et al. A meet-up of acetyl phosphate and c-di-GMP modulates BldD activity for development and antibiotic production. Nucleic Acids Res. 2023 Jul 21;51(13):6870-6882.
② Yao YL,et al. A bacteriocyte symbiont determines whitefly sex ratio by regulating mitochondrial function. Cell Rep. 2023 Feb 10;42(2):112102.
③ Huang Y,et al.JMJD3 acts in tandem with KLF4 to facilitate reprogramming to pluripotency. Nat Commun. 2020 Oct 8;11(1):5061.