染色質(zhì)免疫共沉淀測(cè)序(ChIP-seq)
染色質(zhì)免疫共沉淀(Chromatin Immunoprecipitation,ChIP),是研究體內(nèi)蛋白質(zhì)與DNA相互作用的經(jīng)典方法。將ChIP與高通量測(cè)序技術(shù)相結(jié)合的ChIP-Seq技術(shù),可在全基因組范圍對(duì)特定蛋白的DNA結(jié)合位點(diǎn)進(jìn)行高效而準(zhǔn)確的篩選與鑒定,為研究的深入開(kāi)展打下基礎(chǔ)。
DNA與蛋白質(zhì)的相互作用與基因的轉(zhuǎn)錄、染色質(zhì)的空間構(gòu)型和構(gòu)象密切相關(guān)。運(yùn)用組蛋白特定修飾的特異性抗體或DNA結(jié)合蛋白或轉(zhuǎn)錄因子特異性抗體富集與其結(jié)合的DNA片段,并進(jìn)行純化和文庫(kù)構(gòu)建,然后進(jìn)行高通量測(cè)序,通過(guò)將獲得的數(shù)據(jù)與參考基因組精確比對(duì),研究人員可獲得全基因組范圍內(nèi)某種修飾類(lèi)型的特定組蛋白或轉(zhuǎn)錄因子與基因組DNA序列之間的關(guān)系,也可對(duì)多個(gè)樣品進(jìn)行差異比較。
DNA與蛋白質(zhì)互作(ChIP):提供組蛋白修飾、轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合等抗體富集、建庫(kù)測(cè)序、數(shù)據(jù)分析全流程服務(wù)。具有細(xì)胞,動(dòng)、植物組織,微生物(弓形蟲(chóng)、煙粉虱等)等不同樣本富集建庫(kù)經(jīng)驗(yàn)。
技術(shù)優(yōu)勢(shì):
1)物種范圍廣:細(xì)胞、動(dòng)物組織、植物組織、細(xì)菌微生物多物種富集經(jīng)驗(yàn);
2)微量建庫(kù):只需5ng以上免疫沉淀后的DNA,即可展開(kāi)測(cè)序分析;
3)方案靈活:根據(jù)不同的項(xiàng)目需求,選擇不同的組蛋白修飾特異性抗體。
實(shí)驗(yàn)策略:
分析內(nèi)容:
送樣要求:
項(xiàng)目案例:
標(biāo)題:A meet-up of acetyl phosphate and c-di-GMP modulates BldD activity for development and antibiotic production
發(fā)表雜志:Nucleic Acids Res
影響因子:14.6
發(fā)表年份:2023
(2)微生物:煙粉虱
標(biāo)題:A bacteriocyte symbiont determines whitefly sex ratio by regulating mitochondrial function
發(fā)表雜志:Cell Reports
影響因子:8.8
發(fā)表年份:2023
使用H3K9me3抗體對(duì)±HBt煙粉虱進(jìn)行ChIP-seq分析
(3)細(xì)胞:小鼠
標(biāo)題:ARTICLE JMJD3 acts in tandem with KLF4 to facilitate reprogramming to pluripotency
發(fā)表雜志:Nat Commun
影響因子:16.6
發(fā)表年份:2020
ChIP-seq揭示小鼠細(xì)胞重編程過(guò)程中JMJD3與KLF4協(xié)同作用
參考文獻(xiàn):
① Fu Y,et al. A meet-up of acetyl phosphate and c-di-GMP modulates BldD activity for development and antibiotic production. Nucleic Acids Res. 2023 Jul 21;51(13):6870-6882.
② Yao YL,et al. A bacteriocyte symbiont determines whitefly sex ratio by regulating mitochondrial function. Cell Rep. 2023 Feb 10;42(2):112102.
③ Huang Y,et al.JMJD3 acts in tandem with KLF4 to facilitate reprogramming to pluripotency. Nat Commun. 2020 Oct 8;11(1):5061.