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m6A甲基化-常規(guī)mRNA 甲基化測(cè)序(MeRIP)
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m6A甲基化-常規(guī)mRNA +lncRNA甲基化測(cè)序(lnc-MeRIP)
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m6A甲基化-微量mRNA +lncRNA甲基化測(cè)序(Micro- lnc-MeRIP)
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m5C甲基化-常規(guī)mRNA 甲基化測(cè)序(RNA-BS)
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m5C甲基化-常規(guī)mRNA +lncRNA甲基化測(cè)序(lncRNA-BS)
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m5C RNA甲基化測(cè)序(m5C MeRIP-seq)
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m1A 甲基化常規(guī)mRNA甲基化測(cè)序(MeRIP)
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m1A甲基化常規(guī)mRNA +lncRNA甲基化測(cè)序( lnc MeRIP)
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m1A甲基化微量mRNA +lncRNA甲基化測(cè)序( Micro lnc MeRIP)
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m7G甲基化常規(guī)mRNA甲基化測(cè)序( MeRIP)
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m7G甲基化常規(guī)mRNA +lncRNA甲基化測(cè)序( lnc MeRIP)
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m7G甲基化微量mRNA+lncRNA甲基化測(cè)序( Micro lnc MeRIP)
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RNA甲基化液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法 (LC-MS/MS)
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ac4C乙?;疪NA免疫沉淀測(cè)序(acRIP-seq)
ac4C乙?;疪NA免疫沉淀測(cè)序(acRIP-seq)
ac4C RNA乙?;∟4-acetyicytidine,ac4C),N4位乙酰胞嘧啶,是真核原核生物中保守的化學(xué)修飾,早期研究認(rèn)為ac4C主要存在于tRNA和18S rRNA上。近期研究顯示,mRNA上也存在大量的ac4C,該修飾在促進(jìn)蛋白翻譯、影響RNA穩(wěn)定性和可變剪接、調(diào)控基因表達(dá)發(fā)揮重要作用,是繼m6A修飾之后表觀轉(zhuǎn)錄組學(xué)的新興發(fā)展方向。
ac4C RNA修飾的檢測(cè),易基因采用基于抗體富集的ac4C RNA乙?;庖吖渤恋?(acetylated RNA Immunoprecipitation,acRIP)技術(shù):基于抗體特異性結(jié)合乙?;揎棄A基原理,以RNA免疫共沉淀富集乙?;揎椘螢榛A(chǔ),然后通過高通量測(cè)序(acRIP-seq),在轉(zhuǎn)錄組范圍內(nèi)研究發(fā)生乙?;腞NA區(qū)域,高效獲得結(jié)果。
易基因提供適用于不同科研需求的acRIP -seq技術(shù):
1)ac4C 乙?;?常量mRNA acRIP -seq
2)ac4C 乙?;?常量mRNA +lncRNA acRIP -seq
3)ac4C 乙酰化-微量mRNA +lncRNA acRIP -seq
實(shí)驗(yàn)原理:
首先通過poly(A)捕獲RNA,將獲得的RNA打成100nt左右的小片段;之后使用ac4C特異性抗體進(jìn)行免疫共沉淀,含有ac4C修飾的RNA片段被富集并回收;進(jìn)而對(duì)回收的RNA進(jìn)行文庫(kù)構(gòu)建、高通量測(cè)序和生物信息學(xué)分析,通過peak分析鑒定出ac4C修飾的位點(diǎn)。

實(shí)驗(yàn)策略:
信息分析:
送樣要求:
研究案例:
mRNA中胞嘧啶核苷乙?;商岣叻g效率
Acetylation of Cytidine in mRNA Promotes Translation Efficiency
期刊:Cell
IF:45.5
N4-乙酰胞嘧啶(ac4C)是一種由乙酰轉(zhuǎn)移酶NAT10催化的mRNA修飾。本研究通過對(duì)WT和下調(diào)NAT10的Hela細(xì)胞進(jìn)行acRIP-seq和mRNA-seq,揭示了ac4C在編碼序列中的特異性乙?;瘏^(qū)域富集。NAT10敲除導(dǎo)致在比對(duì)mRNA位點(diǎn)的ac4C檢測(cè)減少,并與靶向mRNA整體下調(diào)相關(guān)。對(duì)mRNA半衰期分析顯示,乙?;痬RNA穩(wěn)定性依賴于NAT10。進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)表明,mRNA乙?;隗w內(nèi)外增強(qiáng)底物翻譯。在ac4C peaks的密碼子含量分析揭示了在動(dòng)態(tài)位點(diǎn)中胞嘧啶的偏倚表達(dá),從而影響mRNA解碼效率。這些發(fā)現(xiàn)擴(kuò)展了mRNA修飾范圍(包括乙?;瘹埢㈥U明了ac4C在mRNA翻譯調(diào)控中的作用。

acRIP-seq繪制mRNA ac4C圖譜
參考文獻(xiàn):
以上就是關(guān)于ac4C乙酰化RNA免疫沉淀測(cè)序(acRIP-seq)技術(shù)的介紹,易基因科技提供全面的表觀遺傳學(xué)研究整體解決方案,有需要的老師可以通過以下方式聯(lián)系我們。
0755-28317900 / 18124167839