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多組學(xué)聯(lián)合分析方案

Multi omics Joint Analysis Scheme

多組學(xué)(Multi-Omics)是探究生物系統(tǒng)中多種物質(zhì)之間相互作用的方法,包括基因組學(xué)、表觀基因組學(xué)、轉(zhuǎn)錄組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)、代謝組學(xué)、微生物組學(xué)等,這些物質(zhì)共同影響生命系統(tǒng)的表型、性狀等。對不同組學(xué)數(shù)據(jù)源進行歸一化處理、比較分析,建立不同組間數(shù)據(jù)的關(guān)系,綜合多組學(xué)數(shù)據(jù)對生物過程從不同組學(xué)水平進行全面的深入闡釋,從而更好的對生物系統(tǒng)進行全面了解。


多組學(xué)研究方案
1. 研究目標和設(shè)計


  • 目標設(shè)定:明確研究目的,比如探究特定疾病的病因、病理機制或藥物反應(yīng)。
  • 樣本選擇:根據(jù)研究目標選擇合適的樣本類型(如血液、組織、細胞等)和樣本量。
  • 實驗設(shè)計:設(shè)計對照組和實驗組,確保實驗的可重復(fù)性和隨機性。
2. 數(shù)據(jù)收集與預(yù)處理
基因組學(xué):
  • 進行高通量測序(如WGS或WES)以獲得基因組數(shù)據(jù)。
  • 預(yù)處理包括質(zhì)量控制、序列比對、變異檢測和基因型鑒定。
表觀基因組學(xué):
  • 通過WGBS或RRBS等技術(shù)獲取DNA甲基化數(shù)據(jù)。
  • 預(yù)處理包括甲基化水平的定量和差異甲基化區(qū)域(DMR)的鑒定。
轉(zhuǎn)錄組學(xué):
  • 利用RNA-seq技術(shù)獲取基因表達數(shù)據(jù)。
  • 預(yù)處理包括序列比對、表達量估計和差異表達基因(DEG)分析。
蛋白質(zhì)組學(xué):
  • 通過質(zhì)譜技術(shù)(如LC-MS/MS)獲取蛋白質(zhì)表達和修飾數(shù)據(jù)。
  • 預(yù)處理包括肽段鑒定、蛋白質(zhì)定量和差異蛋白質(zhì)分析。
代謝組學(xué):
  • 通過NMR或LC-MS技術(shù)獲取代謝物數(shù)據(jù)。
  • 預(yù)處理包括代謝物鑒定和相對定量。
微生物組學(xué):
  • 通過16S rRNA測序或宏基因組測序分析微生物組成。
  • 預(yù)處理包括OTU聚類、物種注釋和多樣性分析。
3. 數(shù)據(jù)分析
單組學(xué)分析:
  • 對每個組學(xué)的數(shù)據(jù)進行獨立分析,識別關(guān)鍵的生物標志物和調(diào)控網(wǎng)絡(luò)。
多組學(xué)整合分析:
  • 利用統(tǒng)計和生物信息學(xué)方法整合不同組學(xué)的數(shù)據(jù),如相關(guān)性分析、網(wǎng)絡(luò)分析和機器學(xué)習(xí)。
  • 識別跨組學(xué)間的相互作用和調(diào)控機制。
4. 結(jié)果驗證
實驗驗證:


  • 通過實驗方法(如qPCR、Western blot、ELISA等)驗證關(guān)鍵基因、蛋白質(zhì)和代謝物的表達變化。
  • 進行功能實驗驗證候選基因或蛋白質(zhì)的功能。


應(yīng)用領(lǐng)域

  • 基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)
  • 植物生理病理機制
  • 分子育種
  • 臨床醫(yī)學(xué)研究
  • 微生物代謝
  • 藥物研發(fā)

多組學(xué)案例展示: 
 
WGBS+totalRNA-seq:探索差異甲基化區(qū)域(DMR)與差異表達基因、miRNA和siRNA之間的重疊關(guān)系,揭示基因表達調(diào)控的復(fù)雜網(wǎng)絡(luò)。

 
血液組織RRBS+RNAseq:通過皮爾森關(guān)聯(lián)分析,研究DMR甲基化水平與基因表達水平間的相關(guān)性,深入理解表觀遺傳對基因表達的影響。

 
腸道宏基因組+宏病毒組:比較健康與炎癥性腸病(UC)組中噬菌體與細菌豐度的相關(guān)性,發(fā)現(xiàn)微生物組與疾病之間的潛在聯(lián)系。

 
腸道菌群16S+血液代謝組+肝臟轉(zhuǎn)錄組:運用多元線性模型關(guān)聯(lián)分析,篩選出關(guān)鍵調(diào)控模型,構(gòu)建低劑量抗生素飼喂促進仔豬快速生長的多組學(xué)調(diào)控網(wǎng)絡(luò)。
參考文獻:
1) Yan H, Bombarely A, Xu B, et al.Autopolyploidization in  switchgrass alters phenotype and flowering time viaepigenetic  and tranion regulation[J]. Journal of experimental botany,2019
2) Zhang, D., Hu, Q., … Gao, F. (2019). Epigenetic and transcriptional signatures of  ex situ conserved golden snub-nosed monkeys (Rhinopithecus roxellana).
3) Zuo, T., Lu, X. J., Zhang, Y. (2019). Gut mucosal virome alterations in ulcerative  colitis. Gut, 68(7), 1169-1179.
4) Inter-correlated gut microbiota and SCFAs changes upon antibiotics exposure links with rapid body-mass gain in weaned piglet model. The Journal of nutritional biochemistry,2019, 74: 108246.